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Institut Jacques Monod
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Microscope plein champ ZEISS

 

Principe du plein champ

 

La microscopie plein champ est une technique simple qui induit peu de photoblanchiment comparé à la microscopie confocale. Elle est particulièrement adaptée aux observations longues sur des échantillons peu épais ou observés à faible grossissement. Elle permet d’observer des échantillons colorés grâce aux caméras couleurs, des échantillons transparents grâce aux contraste de phase et contraste interférentiel et d’observer des échantillons en fluorescence. Elle est moins adaptée pour les échantillons épais et études de morphologie en 3D à cause du flou dû à la superposition des plans d’observation sur l’image.
Les images peuvent être déconvoluées (traitement mathématique) après acquisition afin d’en augmenter la résolution et le contraste.

Image de gauche : C. Elegans en contraste de Nomarski ; Jorge Merlet (laboratoire L. Pintard), image de droite Dominika Sliwa (laboratoire J-M. Camadro)

Coupe transversale de feuille de Soldanelle; image en transmission (à gauche) en fluorescence visible excitée sous UV (à droite) Sylvie Meyer (lab Z. Cerovic)

 

Equipement plein champ

 

Microscope plein champ Zeiss :

  • Statif inversé et motorisé Axio Observer Z.1 (zeiss) pour acquisiitons 3D multipositions et mosaïques
  • Acquisition d’images en lumière transmise et contraste de Normarsky DIC
  • Caméra sCMOS Orca Flash4 LT (Hamamatsu)
  • Cool LED pE 400 W
  • Blocs filtres pour la fluorescence: Dapi (365 D395 445/50) ; CFP (436/25 D455 480/40) ; YFP (500/24 D520 542/27) ; GFP (472/30 D495 520/35) ; RFP (531/40 D562 593/40) ; Cy5 (640/30 D660 690/50)
  • Enceinte contrôlée en température et CO2 (Life Imaging Service)
  • Logiciel d’acquisition d’images ZEN Blue (Zeiss) correction d’ombrage et alignement de mosaïque

Objectifs disponibles :

  • 5 X Pl NeoFluar ON 0.15
  • 10 X Pl NeoFluar ON 0.5 Ph
  • 20 X Plan Apo ON 0.8
  • 40 X Plan Apo ON 1.3 Oil DIC
  • 63 X Plan Apo ON 1.4 Oil DIC
  • 100 X Plan Apo ON 1.4 Oil DIC

Manuel d’utilisation 

Stéréo-microscope Lumar

  • Stéréo microscope droit et motorisé en Z Lumar V12 (Zeiss).
  • Platine rotative manuelle
  • Objectifs 0,8x et 1.5x permettant de grossir de 6,4x à 150x.
  • Sources d’illumination pour transmission et réflexion.
  • Lampe à arc HBO 100 pour la fluorescence.
  • Nombreux filtres disponibles pour la fluorescence.
  • Caméra sCMOS Orca Flash 4 LT (Hamamatsu)
  • Logiciel d’acquisition ZEN Blue (Zeiss)