Cytométrie en flux

>> Prestations techniques

Sommaire

La plateforme assure les fonctions suivantes :

Accueil des biologistes, expertise en cytométrie en flux et en images (cytomètre/trieur et imageur en flux Imagestream), traitement et analyse des acquisitions :

Aide au choix des protocoles, des marqueurs fluorescents à utiliser, et des contrôles à réaliser.
Mise en place des protocoles spécifiques d'analyses sur les appareils.
Aide au traitement et analyses des acquisitions.
Aide à l'interprétation des données et à la présentation des résultats.

Encadrement des utilisateurs de l'analyseur Cyan ADP et de l’Imageur en flux ImageStream^X, et formation progressive à l'utilisation de ces 2 appareils pour tout projet de longue durée.

Tri sur l'analyseur-trieur Influx 500. Cet appareil est complexe et ne bénéficie pas de la surveillance automatisée pendant le tri ; il est exclusivement piloté par le personnel expert de la plateforme.

Prestations techniques :

Toutes les techniques de cytométrie en flux sont réalisables dans la mesure où les lasers et la configuration des bancs optiques de l'instrument sont compatibles avec les fluorochromes utilisés.

Les principales prestations techniques concernent :

l'analyse des constituants cellulaires : ADN (cycle, viabilité, …) ARN, protéines, expression d'antigènes membranaires et/ou intracellulaires.
L'analyse de fonctions cellulaires : activation (modification du pH,...) production de cytokines, variation du potentiel membranaire ou mitochondrial, apoptose (activation des caspases, Annexin V/Iodure de propidium, TUNEL,…), activités enzymatiques.
La mise en évidence de cellules transfectées (Lac Z, EGFP, EYFP, DsRED..)

Toutes ces mesures peuvent être associées entre elles et accompagnées d'un TRI des cellules en conditions stériles.

Toutes les applications de la cytométrie en flux sont également des applications de l’imageur en flux ImageStream^X mais il a également ses propres applications basées sur l’image : signalisation cellulaire et translocation moléculaire, internalisation, analyses morphométriques, intéractions cellulaires, mort cellulaire et apoptose, cycle cellulaire et mitoses, ainsi que de nombreuses applications émergentes.